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La salle de la frise servait d'antichambre pour celle d'Agostino Chigi, le premier propriétaire de la villa. Elle doit son nom à la frise, peinte à fresque en 1508 par Baldassarre Peruzzi, qui représente des scènes mythologiques qu'on peut regrouper en deux ensembles.

Un premier ensemble est consacré aux travaux d'Hercule.
Un second raconte les dangers du commerce des dieux.